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人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)检测Elisa试剂盒使用说明 - 尊龙凯时品牌

发布时间:2025-03-01   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒旨在支持科学研究用途,不可用于医学诊断。本文档详细说明了人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)Elisa试剂盒的使用及其检测原理。

人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)检测Elisa试剂盒使用说明 - 尊龙凯时品牌

该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下呈现蓝色,并在酸性环境中转变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)浓度成正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定样品的光密度(OD值),据此计算样品浓度。

样品的收集、处理及保存方法如下:

  • 血清:使用无热原和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。
  • 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。3000转离心30分钟后取上清液。
  • 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
  • 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
  • 保存:如未及时检测,请按一次用量分装并置于-20℃冻存,避免反复冻融,解冻时在室温下均匀充分解冻。

为确保操作顺利,用户应注意以下事项:

试剂盒组成:标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂准备:将20×洗涤缓冲液按1:20稀释,具体为1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。

洗板方法:按照说明步骤进行操作,确保结果准确。

结果判断:通过在Excel工作表中绘制标准曲线,将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,进而得到标准品的线性回归曲线。可依据曲线方程计算各样本的浓度值。

请注意,使用本试剂盒时,应仔细遵循所有操作说明,以确保结果的可靠性和准确性。尊龙凯时始终致力于提供高品质的科研产品,助力每一位研究者的探索之旅。