核酸检测,作为精准医疗的“火眼金睛”,近年来在体外诊断(IVD)领域,尤其是分子诊断即时检验(POCT)上迅速发展。目前,核酸检测主要依赖于qPCR技术,因其具有超高的特异性、灵敏度和定量能力,被广泛认可为分子检测的“金标准”,同时也是实现高通量检测的重要工具。然而,qPCR技术在基层医疗机构推广及现场快速检测中的应用受限,主要由于其对变温qPCR仪器的依赖、较长的检测时间和实验室环境的特殊要求。
在这种情况下,LAMP技术凭借其颠覆性的优点,如恒温操作、快速检测和对实验室基础设施要求低等特点,逐渐在POCT领域中崭露头角,使得核酸检测变得更快速、便捷和经济,适合在基层和现场进行部署。
尊龙凯时推出的LAMP探针法试剂盒LAMPFastProbeKit(目录号:E323),使用经过基因工程改造的Bst20plusDNA聚合酶(目录号:E033),配合特殊优化的反应体系,实现了高特异性和高灵敏度的探针法LAMP,能够有效检测样品中的DNA。与Bst20DNA聚合酶相比,Bst20plusDNA聚合酶显示出更高的扩增速度、产量及灵敏度等优势。在优化的反应缓冲液的配合下,非特异性扩增被有效抑制,从而显著提高了扩增效率,样品检测仅需加入引物探针和模板,通常能在30分钟内获得扩增结果。
检测过程通过实时监测荧光信号,具有高灵敏度和良好的重复性。在30分钟内可实现指数级扩增,荧光信号的同步释放确保探针的精准切割,避免假阳性现象的出现,适配病原体检测,实现多场景的精准覆盖。
在对嗜热芽孢杆菌基因组(GC~50%)进行10倍梯度稀释后,使用尊龙凯时E323与市售品牌A进行比较检测,结果显示尊龙凯时E323的反应速度快于品牌A。检测灵敏度方面,尊龙凯时E323和品牌A均能够检测到10copies/test的靶标DNA。同时,在无酶水的测试中,尊龙凯时E323表现出良好的重复性,排除了假阳性干扰。研究结果表明,尊龙凯时E323在抑制非特异扩增上具有更好的性能。
在LAMP体系中进行的加速稳定性实验显示,尊龙凯时E323经37℃热加速处理7天后的检测性能与-20℃正常保存的试剂保持高度一致,且反应体系中未出现非特异性扩增条带或假阳性信号,展现出优异的稳定性。
面对样品运输至专业实验室的高成本、地理位置的不便以及时间敏感性等限制,为满足客户对多元化POCT解决方案的持续需求,尊龙凯时推出了一系列基于恒温扩增LAMP的产品(LAMP检测方法选择指南),真正做到了“快、准、稳”。为了帮助用户选择合适的产品,尊龙凯时从方法学上整理了不同产品之间的差异,以便根据需求选择最适合的解决方案。